Tip:
Highlight text to annotate it
X
În ziua a doua a procedurii noastre de CPI, vom adăuga anticorpi nostru secundar, efectuați
o etichetare facultativă dublu și etichetarea pas nucleare,
monta lamele noastre la diapozitive, și să obțină imagini de anticorpi noastre cu
un microscop fluorescent.
În primul rând
am aspirat pe primar text anticorpi soluție de spălare a celulelor
de trei ori cu SSTF timp de cinci minute fiecare.
Pregăti următoarea anticorpul conjugat floraform secundar care va lega de
primar de anticorpi.
Diluați *** de blocare secundar
la diluare recomand specificată pe foaia de date
și se incubează la temperatura camerei timp de o oră.
Acoperirea cu folie de plăci împiedică coloranți sensibile din degradante.
Aspirati pe soluția anticorpul secundar, urmată de spălare a celulelor
de trei ori cu SSTF
timp de cinci minute fiecare.
Ca un pas opțional o pereche separată primar și secundar pot fi folosite
pentru a vizualiza un epitop două prin utilizarea unui alt etaj pentru el.
În plus, coloranți ADN obligatorii, *** ar fi DAPI poate fi aplicat fără a fi nevoie de
anticorpi secundari.
Se referă la protocol complet Novus scris pentru instrucțiuni despre *** să se dubleze și
triplu etichetă.
Lamele sunt acum gata pentru a fi montate pe lame de microscop.
Ia-o lamă, apoi se repartizează o picătură de mediu antifade de montare de lent
apelarea în jos pistonul pipetei.
Îndepărtați cu grijă o lamă de acoperire de bine,
permite spălare exces să se scurgă în afara
și locul celulelor cu fața în jos pe diapozitiv.
Poloneză unghia clar pot fi folosite pentru a sigila lamă de acoperire și pentru a preveni-l de la
uscarea.
Slide-uri pot fi acum vizualizate sub un microscop sau depozitate la -20
sau 4 grade Celsius într-o cutie de diapozitive întunecată sau carte de diapozitive.
Limitarea cantitatea de timp în care fiecare diapozitiv este expus la lumina microscop voința consilier
în prelungirea semnalul fluorescent
și pentru a preveni fotografie de albire.