Tip:
Highlight text to annotate it
X
În faza patru, vom inversa noastre inițiale cross-linking proteine pentru a ADN-ului, urmată de
purificare a ADN-ului. Începeți prin a lua fiecare probă anchetă, precum și proba de intrare care
nu au trecut prin etapele precedente IP și se adaugă 8 microlitri de 5 sodiu molar
clorură de la probele microlitri 200, urmate de agitare.
Se incubează la 95 de grade Celsius timp de 15 minute. Pentru a purifica fiecare probă, vom folosi un coloanele obligatorii ADN de siliciu, conform
cu instrucțiunile producătorului. Adăugați mai întâi fiecare probă pentru sumele corespunzătoare
de *** ADN-ului obligatoriu în vortex, apoi transferați fiecare probă într-o coloană plasat în interiorul unui
de colectare tub. Se centrifughează la 15000 g coloanele timp de 1 minut.
Aruncați debitul prin tubul de colectie si adaugati spălare *** de ADN pentru fiecare coloană.
Se centrifughează coloanele de la 15000g timp de un minut. Aruncați din debitul prin tubul de colectare
și de spin coloanele goale de la 15000g timp de două minute pentru a se asigura asigura că acestea sunt complet uscate.
Aruncați tubul de colectare vechi și plasați coloana de purificare într-o eprubetă curată nou.
Adauga 50 microlitri de soluție *** eludare ADN-ului direct la membrana în coloană.
Se lasă să se așeze timp de un minut, apoi efectuați o centrifugare finală de la 15000g timp de 1 minut.
Aruncați coloana de purificare și de a salva de la ADN-ul purificat -20 de grade Celsius până la gata de ultima fază.